Experimentelle Parasitologie
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Serologie

  • Giemsa-gefärbter Blut-/Buffy Coat-Ausstrich
    Durch geeignete Techniken erfolgt eine differenzierte Färbung zellulärer Bestandteile des Blutes sowie intra- und extrazellulärer Blutparasiten sowie Rickettsien.

  • Knott-Test
    Dieses Konzentrationsverfahren ermöglicht die Identifikation von im Blut zirkulierenden L1 von Filarien. Eine wässrige Formalinlösung bewirkt dabei eine Hämolyse der Erythrozyten, die Mikrofilarien werden durch Zentrifugation angereichert. Abschließend erfolgt der mikroskopische Nachweis. Eine abendliche Blutabnahme erhöht die Chance des Nachweises.

  • Antikörpernachweise (ELISA, IFAT, CATT)
    Antikörper-Nachweise gelingen meist ab dem 10. bis 14. Tag post infectionem. Da Antikörpertiter häufig sehr lange persistieren, eignen sich IFAT und ELISA nicht immer zur Therapiekontrolle.

    Der Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA) ist ein antikörperbasiertes Nachweisverfahren, das auf einer von enzymatisch katalysierten Farbreaktion beruht. Beim direkten ELISA binden primäre Antikörper an das nachzuweisende Antigen. Sekundäre, Enzym-konjugierte Antikörper binden spezifisch an den primären Antikörpern und setzen ein Farbsubstrat um. Die Farbreaktion zeigt damit das Vorhandensein von primären Antikörpern an. Beim kompetitiven ELISA besetzen primäre Antikörper Antigen-Epitope und verhindern dort das Andocken Enzym-markierter Antikörper. Hier weist das Ausbleiben einer Farbreaktion das Vorhandensein primärer Antikörper nach.

    Der IFAT (Immun-Fluoreszenz-Antikörper-Test) ähnelt dem direkten ELISA dahingehend, dass gebundene Primärantikörper mittels FITC-markierten Sekundärantikörpers nachgewiesen werden. In diesem Falle erfolgt die Anregung des Fluorophors jedoch mittels UV-Licht, die Lichtemission kann mit einem Fluoreszenzmikroskop detektiert werden.

    Beim CATT (Card Agglutination Test for Trypanosoma)werden zirkulierende Antikörper gegen verschiedene Trypanosomen-Arten nachgewiesen. Hierbei binden die Antikörper an Farbstoff-markiertes Antigen, was zur Ausfällung makroskopisch detektierbarer, farbiger Antigen-Antikörper-Agglutinate führt.

  • Antigennachweis (ELISA)
    Zirkulierendes Antigen weiblicher, fertiler Dirofilaria immitis bei Hund und Katze wird von einem spezifischen Antikörper gebunden. In einem 2. Schritt dockt ein anderer, primärer Enzym-gekoppelter Antikörper an. Nach Zugabe eines Farbsubstrates ermöglicht eine daraufhin einsetzende, durch das Enzym (Meerrettichperoxidase) katalysierte Farbreaktion den Nachweis des Vorhandensein von Parasitenantigen.